© Borgis - Postępy Fitoterapii 1/2013, s. 8-16
*Bogdan Kędzia, Elżbieta Hołderna-Kędzia
Działanie na bakterie i grzyby alkaloidów i innych grup związków roślinnych
The effect of alkaloids and other groups of plant compounds on bacteria and fungi
Instytut Włókien Naturalnych i Roślin Zielarskich w Poznaniu
Dyrektor Instytutu: prof. dr hab. Grzegorz Spychalski
Summary
The studies included 35 substances belonging to alkaloids, coumarins, quinones, polyacetylenes, saponines and other chemical groups. It was documented that the strongest antibacterial activity on Gram-positive bacteria showed; shikonine and her derivates, berberine chloride, sanguinarine nitrate, falkarionol, digitonine and usnic acid. The sanguinarine nitrate and digitonine showed strong activity on Gram-negative bacteria. Imperatorine, sanguinarine nitrate, sempervirine, galantamine hydrobromide, falkarinol, alantolactone and aristolochic acid showed the strong activity against yeast fungi and dermatophytes. The mentioned substances inhibited the growth of bacteria in concentration limits 1-250 μg/ml. The conducted studies show the possibility of the use some plant substances in medical practice.
Wstęp
Wśród związków roślinnych o potencjalnym działaniu na bakterie i grzyby znalazły się alkaloidy, w tym alkaloidy izochinolinowe i steroidowe oraz alkaloidy z grupy Amaryllidaceae i Colchicum. Ponadto badaniami objęto wybrane kumaryny, chinony, poliacetyleny, saponiny i związki roślinne z innych grup chemicznych.
Cel pracy
Celem pracy była ocena działania przeciwdrobnoustrojowego substancji roślinnych należących do wymienionych grup chemicznych z punktu widzenia poznawczego oraz ewentualnego ich zastosowania w praktyce medycznej. W opracowaniu wykorzystano wyniki badań własnych, które wykonano w latach 1976-2012 (1, 2).
Materiał i metody
Badane substancje
Badania obejmowały 35 substancji, które pochodziły z obrotu handlowego oraz były izolowane z materiału roślinnego we własnym zakresie.
Z firmy Aldrich otrzymano: chlorek berberyny, chlorek palmatyny i umbeliferon. Natomiast z firmy Roth pochodziły następujące substancje roślinne: chelidonina, azotan sangwinaryny, tomatyna, tomatydyna, solanidyna, ksantotoksyna, digitonina, chlorowodorek prymuliny, kwas sorbowy, kapsaicyna, glukotropeolina, kwas usninowy, kwas aristolochiowy i katechina.
W Instytucie Roślin i Przetworów Zielarskich (obecnie Instytut Włókien Naturalnych i Roślin Zielarskich) w Poznaniu izolowano dla potrzeb naukowych następujące substancje użyte w badaniach: chlorek jatroryzyny (z korzenia Berberis vulgaris), semperwirynę (z kłączy Gelsemium sempervirens), bromowodorek solasodyny (z ziela Solanum laciniatum), chlorowodorek galantaminy (z bulw Galantus nivalis), kolchaminę (z nasion Colchicum autumnale), imperatorynę (z korzeni Archangelica officinalis), szikoninę, acetyloszikoninę, izopropyloszikoninę i acetoksyrojleanon (z korzeni Salvia officinalis), falkarinol i hydroksyfalkarinol (z korzeni Panax vietnamensis), poliacetylen o nieustalonej budowie chemicznej (z owoców Polyscias fruticosa), spiroeter (en-in-dicykloeter) (z olejku eterycznego otrzymanego z koszyczków Chamomilla recutita), konwalarynę i konwalamarynę (z liści Convallaria majalis), alantolakton (heleninę) (z kłączy Inula helenium) i synalbinę (z nasion Synapis alba).
Drobnoustroje
W badaniach używano szczepy wzorcowe pochodzące z następujących kolekcji mikrobiologicznych: ATCC (American Type Culture Collection), CNCTC (Czechoslovak National Collection of Type Cultures) oraz PZH (Państwowy Zakład Higieny). Poza tym do badań służyły szczepy drobnoustrojów wyizolowane z materiału szpitalnego (S) oraz z produktów żywnościowych (P).
Określanie aktywności przeciwdrobnoustrojowej
Badane substancje rozpuszczano w DMSO (firmy Serva) w stężeniu 100 lub 10 mg/ml i sporządzano z nich rozcieńczenia w podłożach płynnych. W przypadku bakterii używano podłoża Antibiotic Broth, a w przypadku grzybów podłoża Sabouraud Broth (oba podłoża firmy Merck). Oznaczenia prowadzono w granicach stężeń 1-1000 μg/ml. Do poszczególnych rozcieńczeń badanych substancji o objętości 1 ml dodawano po 0,1 ml 24-48 godz. hodowli bakterii lub grzybów drożdżoidalnych oraz 72 godz. hodowli dermatofitów i grzybów pleśniowych. Inokulum badanych drobnoustrojów mieściło się w granicach 105-106 komórek w 1 ml. Próbki inkubowano przez 24-48 godz. w temp 37°C (bakterie i grzyby drożdżoidalne chorobotwórcze dla człowieka oraz dermatofity) lub w temp. 25°C (grzyby drożdżoidalne i pleśniowe izolowane z produktów żywnościowych). Następnie określano najmniejsze stężenie badanych substancji hamujące wzrost użytych drobnoustrojów (MIC – Minimal Inhibitory Concentration).
Wyniki
Wyniki badań przedstawione w tabeli 1 wskazują, że chlorek berberyny (alkaloid izochinolinowy z grupy protoberberyny) działał na bakterie Gram-dodatnie wielokrotnie silniej (MIC w granicach 10-150 μg/ml) w porównaniu do bakterii Gram-ujemnych (MIC w granicach 50-2.000 μg/ml). Natomiast działanie chlorku berberyny oraz chlorku palmatyny i chlorku jatroryzyny, dwóch innych alkaloidów izochinolinowych z grupy protoberberyny, na grzyby drożdżoidalne i pleśniowe oraz dermatofity, było stosunkowo słabe (MIC w granicach 500-2500 μg/ml) (tab. 2).
Tabela 1. Działanie chlorku berberyny (alkaloidu izochinolinowego z grupy protoberberyny) na bakterie.
Drobnoustroje | MIC (μg/ml) Chlorek berberyny |
Bakterie Gram-dodatnie Staphylococcus aureus ATCC 6538P Staphylococcus aureus 1 (S) Streptococcus viridans OWG/76 (S) Streptococcus pyogenes OWG/253 (S) Streptococcus pneumoniae OWG8514 (S) Enterococcus faecalis ATCC 8040 Corynebacterium sp. OWG/581 (S) | 75 100 25 10 25 150 10 |
Bakterie Gram-ujemne Haemophilus influenzae OWG/112 (S) Haemophilus parainfluenzae OWG/178 (S) Escherichia coli PZH 026B6 Klebsiella pneumoniae 231 (S) Citrobacter freundii 53 (S) Enterobacter cloacae 87 (S) Proteus mirabilis 11 (S) Pseudomonas aeruginosa OWG/89/9 | 50 100 1500 1500 1500 1000 2000 1000 |
Tabela 2. Działanie chlorku berberyny, chlorku palmatyny i chlorku jatroryzyny (alkaloidów izochinolinowych z grupy protoberberyny) na grzyby.
Drobnoustroje | MIC (μg/ml) |
Chlorek berberyny | Chlorek palmatyny | Chlorek jatroryzyny |
Grzyby drożdżoidalne Candida albicans PZH 1409 PCM Candida krusei S2 20 (S) Candida guilliermondii 11 (S) Candida parapsilosis CNCTC 8/44 Geotrichum candidum OWG/25 (S) Saccharomyces cerevisiae Ja-64 (P) Torulopsis utilis CNCTC 32/49 Cryptococcus neoformans 1972 (S) | 1000 500 1000 750 500
1000 1000 | 1000
750
100 1000 1000 | 1000
1000
1000 1000 |
Grzyby pleśniowe Aspergillus fumigatus 15 (P) Penicillium notatum 18 (P) Scopulariopsis brevicaulis 7 (P) Cladosporium herbarum 3 (P) | 2500 2500 1000 1000 | 2000 2500 1000 1500 | 2500 2500 1000 1000 |
Dermatofity Trichophyton mentagrophytes 32 (S) Trichophyton gypseum 870 G/41 (S) Microsporum gypseum 13 (S) | 1000 1500 750 | 1000 1000 750 | 1000 1000 1000 |
Z danych przedstawionych w tabeli 3 można wnioskować, że chelidonina i azotan sangwinaryny (alkaloidy izochinolinowe z grupy benzofenantrydyny) różniły się zasadniczo w działaniu na bakterie i grzyby drożdżoidalne. Chelidonina działała na wymienione drobnoustroje wielokrotnie słabiej (MIC w granicach 500-1500 μg/ml) w porównaniu do azotanu sangwinaryny (MIC w granicach 10-250 μg/ml). Działanie chelidoniny na grzyby pleśniowe było podobne do działania tego alkaloidu na bakterie i grzyby drożdżoidalne (MIC w granicach 750-1500 μg/ml), natomiast na dermatofity chelidonina działała znacznie silniej (MIC w granicach 100-250 μg/ml).
Tabela 3. Działanie chelidoniny i azotanu sangwinaryny (alkaloidów izochinolinowych z grupy benzofenantrydyny) na bakterie i grzyby.
Drobnoustroje | MIC (μg/ml) |
Chelidonina | Azotan sangwinaryny |
Bakterie Staphylococcus aureus ATCC 6538P Pseudomonas aeruginosa NCTC 10663 | 500 1000 | 100 250 |
Grzyby drożdżoidalne Candida albicans PZH 1409 PCM Candida albicans CNCTC 49/64 Candida krusei CNCTC 40/53 Candida parapsilosis CNCTC 8/44 Candida lipolytica CNCTC 4/44 Saccharomyces cerevisiae CNCTC 53/67 Saccharomyces cerevisiae Ja-64 (P) Saccharomyces carlsbergensis (P) Torulopsis utilis CNCTC 32/49 Cryptococcus neoformans 1972 (S) Rhodotorula rubra R 36 (P) | 750
1500 750
1000 750
| 100 100 200
100 100 10 100 100 100 100 |
Grzyby pleśniowe Aspergillus fumigatus 15 (P) Penicillium notatum 18 (P) Scopulariopsis brevicaulis 7 (P) Cladosporium herbarum 3 (P) | 750 1000 1500 1000 | |
Dermatofity Keratinomyces ajelloi 30 (S) Trichophyton mentagrophytes 32 (S) Trichophyton gypseum 13 (S) | 250 100 250 | |
Powyżej zamieściliśmy fragment artykułu, do którego możesz uzyskać pełny dostęp.
Mam kod dostępu
- Aby uzyskać płatny dostęp do pełnej treści powyższego artykułu albo wszystkich artykułów (w zależności od wybranej opcji), należy wprowadzić kod.
- Wprowadzając kod, akceptują Państwo treść Regulaminu oraz potwierdzają zapoznanie się z nim.
- Aby kupić kod proszę skorzystać z jednej z poniższych opcji.
Opcja #1
29 zł
Wybieram
- dostęp do tego artykułu
- dostęp na 7 dni
uzyskany kod musi być wprowadzony na stronie artykułu, do którego został wykupiony
Opcja #2
69 zł
Wybieram
- dostęp do tego i pozostałych ponad 7000 artykułów
- dostęp na 30 dni
- najpopularniejsza opcja
Opcja #3
129 zł
Wybieram
- dostęp do tego i pozostałych ponad 7000 artykułów
- dostęp na 90 dni
- oszczędzasz 78 zł
Piśmiennictwo
1. Kędzia B, Hołderna-Kędzia E, Grabowska H. Poszukiwanie antybiotycznych substancji roślinnych. Dokumentacja tematu statutowego nr 24/91/Y. Inst Rośl Przetw Ziel, Poznań 1994. 2. Kędzia B, Hołderna-Kędzia E. Działanie antybiotyczne substancji roślinnych na drobnoustroje. Badania wykonane w latach 1976-2012. Dane nieopublikowane.